A：
石蜡或冰冻切片做原位杂交时易脱落漂片，主要是载玻片未做黏附处理、固定时间不足、脱蜡水化流程过快、蛋白酶消化过度破坏组织结构；实验需提前用多聚赖氨酸或 APES 处理玻片增强黏附性，规范组织固定时长，放慢脱蜡水化梯度步骤，调低蛋白酶 K 浓度并缩短消化时间，减少组织结构损伤，避免切片脱落。
Q：
FISH 荧光原位杂交荧光信号弱、亮度低看不清怎么优化？
A：
FISH 荧光信号偏弱、亮度不足难以观察，原因包括探针标记效率低、变性杂交不充分、样本自发荧光干扰、抗淬灭剂使用不当及荧光拍照参数不合适；实验优先选用高纯度高标记效率探针，严格把控样本与探针共变性条件，提前做自发荧光淬灭处理，杂交后及时使用优质抗淬灭封片剂，调节荧光显微镜曝光与增益参数，可显著增强特异性荧光信号。
