实验原理/Experimental principle
本产品基于Tris-Acetate缓冲系统的聚丙烯酰胺凝胶电泳技术。蛋白质在电场中通过凝胶的三维网状结构时,因分子量大小不同而实现分离:分子量越大迁移越慢。
本产品采用Tris-Acetate中性缓冲体系(凝胶pH 7.0),相较于传统Tris-Glycine系统(pH 8.8),可有效减少碱性环境下超大分子量蛋白的降解或修饰,条带更清晰。电泳时,Acetate⁻作为前导离子、Tricine⁻作为尾随离子,形成稳定的离子迁移体系,确保超大分子量蛋白顺利进入分离胶。
技术流程/Procedure
一、准备预制胶
将预制胶从4℃取出,撕掉底部胶条,缓慢垂直拔出梳子。检查加样孔是否完整。
二、安装电泳槽
将预制胶装入兼容的电泳槽中(如Bio-Rad、天能、六一、君意东方等)。加入Tris-Acetate SDS电泳缓冲液(变性电泳)或非变性电泳缓冲液(非变性电泳)。内槽缓冲液加满,外槽加至刻度线。用注射器或移液器吹打加样孔,去除储存液和气泡。
三、上样
将蛋白样品与上样缓冲液混合,加热变性后加入加样孔中。
四、电泳
盖上电泳槽上盖,连接电泳仪。建议电泳条件:200v 25-30min。
五、后续检测
电泳结束后取出凝胶,进行考马斯亮蓝染色或Western Blot转印。转膜时建议将甲醇浓度降至5%或使用PVDF膜,并适当延长转印时间(如4℃过夜转印),以提高大分子量蛋白的转移效率。
产品优势/Highlights
✪ 专业分离
专为大分子量蛋白及超大蛋白复合物分离设计,有效解决高分子量蛋白聚集沉淀问题;
✪ 体系优化
有效解决大蛋白在传统SDS-PAGE中拖尾或模糊的问题,显著提升分辨率;
✪ 即用便捷
预制胶形式,即开即用,兼容主流电泳槽,节省时间。