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SDS-PAGE梯度预制胶(Bis-Tris,4-12%)
SDS-PAGE梯度预制胶(Bis-Tris,4-12%)
SDS-PAGE Gradient Pre-Gel with Bis-Tris (spacer gel 4-12%) | SDS-PAGE梯度预制胶(Bis-Tris,4-12%)
货号
BG038-12
BG038-15
规格
10片/12 wells
10片/15 wells
本产品基于Bis-Tris中性缓冲系统,为即开即用型预制胶,适用于SDS-PAGE蛋白分离及Western Blot检测。可同时分离10-180 kDa范围内的宽分子量蛋白。
实验原理
技术流程
产品优势

实验原理/Experimental principle

本产品采用Bis-Tris缓冲体系,凝胶pH呈中性(6.4-7.0),相较传统Tris-Glycine系统(分离胶pH 8.8),可有效减少碱性条件下蛋白的降解、脱酰胺修饰或非特异性聚集,适用于磷酸化蛋白、膜蛋白等对pH敏感的样品,条带更清晰锐利,分辨率更高。


本产品采用4-12%连续浓度梯度的分离胶设计,在一块凝胶内实现从胶顶部(4%)到胶底部(12%)的浓度连续递增变化,从而使10-180 kDa范围内的宽分子量蛋白在同一块胶上获得良好分离。

技术流程/Procedure

一、准备预制胶

将预制胶从4℃取出,撕掉底部胶条,缓慢垂直拔出梳子。检查加样孔是否完整。


二、安装电泳槽

将预制胶装入兼容的电泳槽中(如Bio-Rad、天能、雅酶等)。加入Bis-Tris专用电泳缓冲液(MOPS或MES,推荐使用MOPS用于中高分子量蛋白,MES用于低分子量蛋白)。内槽缓冲液加满,外槽加至刻度线。用注射器或移液器吹打加样孔,去除储存液和气泡。


三、上样

将蛋白样品与上样缓冲液混合,加热变性后加入加样孔中。15孔预制胶最大上样量25 μL,建议上样量20-25 μL。使用SDS-PAGE上样缓冲液(含还原剂如DTT或β-巯基乙醇)。


四、电泳

盖上电泳槽上盖,连接电泳仪。建议恒压电泳:200 V恒压,电泳约25-30分钟,直至溴酚蓝指示剂到达凝胶底部。也可先80-100 V电泳10-15分钟,待样品进入分离胶后调至160 V继续电泳。


五、后续检测

电泳结束后取出凝胶,进行考马斯亮蓝染色、银染或Western Blot转印检测。

产品优势/Highlights

✪ 宽范围分离

同时分离高分子量和小分子量蛋白,无需筛选多种固定浓度胶;

✪ 体系优化

有效减少碱性条件下蛋白降解或修饰,优于传统Tris-Gly体系;

✪ 即用便捷

预制胶形式,即开即用,兼容主流电泳槽,节省时间。

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