实验原理/Experimental principle
本产品基于Hepes-Tris缓冲系统的聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,相较于传统Tris-Glycine系统(pH 8.8),可有效减少碱性环境下蛋白的降解或修饰,条带更清晰锐利,且电泳速度更快(200V约25-30分钟)。
本产品采用8-20%连续梯度凝胶设计,顶部8%孔隙较大适合大分子量蛋白,底部20%孔隙较小适合小分子量蛋白,可同时分离10-90 kDa范围内的宽分子量蛋白。凝胶不含SDS,可用于变性或非变性电泳,凝胶厚度1.5mm,适合上样量较大的样品。
技术流程/Procedure
一、准备预制胶
将预制胶从4℃取出,撕掉底部胶条,缓慢垂直拔出梳子,检查加样孔是否完整。
二、安装电泳槽
将预制胶装入兼容的电泳槽中(如Bio-Rad、天能等),放入内槽。加入Hepes专用电泳缓冲液(变性电泳使用SDS-Hepes缓冲液,非变性电泳使用不含SDS的Hepes缓冲液)。内槽缓冲液加满,外槽加至刻度线。用注射器或移液器吹打加样孔,去除储存液和气泡。
三、上样
将蛋白样品与上样缓冲液混合,加热变性后加入加样孔中。15孔预制胶最大上样量20-25μL,建议上样量10-20 μL。
四、电泳
盖上电泳槽上盖,连接电泳仪。建议恒压电泳:200 V,电泳约25-30分钟,直至溴酚蓝指示剂到达凝胶底部。
五、后续检测
电泳结束后取出凝胶,进行考马斯亮蓝染色、银染或Western Blot转印检测。
产品优势/Highlights
✪ 高效分离
支持高电压快速电泳,同时分离中高分子量(>90 kDa)至小分子量(<10 kDa)蛋白;
✪ 体系优化
减少离子不均匀现象,蛋白条带平整、分辨率高,背景低,优于传统Tris-Gly体系;
✪ 即用便捷
预制胶形式,即开即用,兼容主流电泳槽,节省时间。