实验原理/Experimental principle
本产品基于Hepes-Tris缓冲系统的聚丙烯酰胺凝胶电泳技术。在电场作用下,蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶的三维网状结构中迁移,因其分子量大小不同而受到不同的筛分阻力,从而实现分离:分子量越大的蛋白质迁移越慢,分子量越小的蛋白质迁移越快。本产品采用Hepes缓冲体系,凝胶pH呈中性,相较于传统Tris-Glycine系统(分离胶pH 8.8),可有效减少碱性环境下蛋白的降解、脱酰胺修饰或非特异性聚集,尤其适用于对pH敏感的蛋白,条带更清晰锐利。同时,Hepes体系具有更高的离子强度和更好的缓冲能力,可在较高电压下(如200V)快速电泳(约25-30分钟完成),而传统Tris-Glycine系统通常需要60-90分钟。
技术流程/Procedure
将预制胶从4℃取出,撕掉底部胶条,缓慢垂直拔出梳子,检查加样孔是否完整。
将预制胶装入兼容的电泳槽中(如Bio-Rad、天能等),放入内槽。加入Hepes专用电泳缓冲液(变性电泳使用SDS-Hepes缓冲液,非变性电泳使用不含SDS的Hepes缓冲液)。内槽缓冲液加满,外槽加至刻度线。用注射器或移液器吹打加样孔,去除储存液和气泡。
将蛋白样品与上样缓冲液混合,加热变性后加入加样孔中。
盖上电泳槽上盖,连接电泳仪。建议恒压电泳:200 V,电泳约25-30分钟,直至溴酚蓝指示剂到达凝胶底部。
电泳结束后取出凝胶,进行考马斯亮蓝染色、银染或Western Blot转印检测。
产品优势/Highlights
✪专业分离
专为中分子量蛋白(30-150 kDa)的高效分离设计,条带清晰,快速电泳;
✪ 快速电泳
高电压快速电泳,大幅缩短实验时间;
✪ 即用便捷
预制胶形式,即开即用,兼容主流电泳槽,节省时间。