实验原理/Experimental principle
本产品基于非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（Native PAGE）原理，用于在保留蛋白质天然构象和生物活性的条件下进行分离分析。与变性SDS-PAGE不同，本体系不使用SDS和还原剂，也不对样品进行加热处理，因此蛋白质能够维持其天然的三维结构、亚基组装状态及生物功能。
电泳过程中，蛋白质依据其固有的等电点、分子形状及分子量大小的综合效应进行迁移，而非单纯按分子量分离——即同时受自身电荷密度和凝胶分子筛效应的双重影响。本缓冲液维持中性至弱碱性pH环境（约pH 8.0-8.8），接近多数蛋白质的生理条件，确保电泳过程中蛋白质构象稳定。
技术流程/Procedure
一、配制1×工作液
取适量5×浓缩缓冲液，用去离子水按1:5比例稀释（例如：100 mL浓缩液 + 400 mL去离子水），搅拌均匀即可使用。若浓缩液出现沉淀，可于37℃水浴加热溶解后再行稀释。
二、安装电泳装置
将预制Native PAGE凝胶或自制非变性凝胶装入垂直电泳槽。阴极槽（上方/外槽）注入配制好的1×阴极缓冲液，阳极槽注入配套的阳极缓冲液。确认装置无漏液。注意：电泳全过程建议在冰浴或4℃冷室中进行，以防止电泳产热导致蛋白质变性失活。
三、上样
将非变性处理的蛋白样品（不含SDS和还原剂，未经加热处理）与配套的Native PAGE样品缓冲液混合均匀。小心加入凝胶加样孔中，根据加样孔容量通常上样10-30 μL。同时上样天然蛋白Marker用于分子量估算。注意：避免加热样品，以免破坏蛋白质天然构象。
四、电泳
盖好电泳槽上盖，连接电泳仪电源。建议电泳条件：恒压100-150V，总电泳时间约40-60分钟。待溴酚蓝指示剂到达凝胶底部时结束电泳。注意：Native PAGE产热较高，必须保持冰浴冷却；电压不宜过高，以免凝胶过热变形。
五、后续检测
电泳结束后关闭电源，取出凝胶，根据实验目的进行检测。
产品优势/Highlights
✪ 非变性设计
专为Native PAGE阴极电泳优化，不含SDS及还原剂，有效保持蛋白天然构象；
✪ 高倍浓缩
5×浓缩液设计，按1:4比例稀释使用，单瓶处理量大，经济实用，储存方便；
✪ 适配主流体系
兼容蓝绿及无色Native PAGE，适用于Tris-Glycine及Hepes等非变性电泳体系。