实验原理/Experimental principle
本产品为非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（Native PAGE）的阳极缓冲液，与阴极缓冲液配套使用，共同构成完整的非变性电泳体系。电泳时，阳极缓冲液置于电泳槽下方（内槽），阴极缓冲液置于上方（外槽），在电场作用下，带负电荷的蛋白质从阴极向阳极定向迁移，通过凝胶孔道实现分离。
本缓冲液的核心功能是维持电泳体系的pH稳定。电泳过程中，阴极产生OH⁻、阳极产生H⁺，若不加以控制会导致pH波动，引起蛋白质变性。阳极缓冲液与阴极缓冲液协同作用，将凝胶区域pH稳定在中性至弱碱性范围（约pH 8.0-8.8），接近生理条件，从而保护蛋白质的天然构象和生物活性。
技术流程/Procedure
一、配制1×工作液
取适量5×浓缩缓冲液，用去离子水按1:5比例稀释（例如：100 mL浓缩液 + 400 mL去离子水），搅拌均匀即可使用。若浓缩液出现沉淀，可于37℃水浴加热溶解后再行稀释。
二、安装电泳装置
将预制Native PAGE凝胶或自制非变性凝胶装入垂直电泳槽。阳极槽注入配制好的1×阳极缓冲液，阴极槽注入1×阴极缓冲液（Native PAGE阴极电泳缓冲液I）。确认装置无漏液。注意：电泳全过程建议在冰浴或4℃冷室中进行，以防止电泳产热导致蛋白质变性失活。
三、上样
将非变性处理的蛋白样品（不含SDS和还原剂，未经加热处理）与配套的Native PAGE样品缓冲液混合均匀。小心加入凝胶加样孔中，根据加样孔容量通常上样10-30 μL，同时上样天然蛋白Marker用于分子量估算。注意：避免加热样品，以免破坏蛋白质天然构象。
四、电泳
盖好电泳槽上盖，连接电泳仪电源。注意电极连接：阳极缓冲液所在槽接正极（红色），阴极缓冲液所在槽接负极（黑色）。建议电泳条件：恒压100-150V，总电泳时间约40-60分钟。待溴酚蓝指示剂到达凝胶底部时结束电泳。
注意：Native PAGE产热较高，必须保持冰浴冷却。
五、后续检测
电泳结束后关闭电源，取出凝胶。根据实验目的进行检测：酶活性染色（需在非变性条件下进行）、考马斯亮蓝染色、银染或Western Blot。若进行Western Blot，转膜缓冲液中可不加甲醇以利于高分子量蛋白的转移。本体系适用于同工酶分析、蛋白复合物组装状态鉴定及蛋白质相互作用研究。
产品优势/Highlights
✪ 非变性阳极设计
专为Native PAGE阳极电泳优化，不含SDS及还原剂，保障蛋白天然构象及复合物完整性；
✪ 高倍浓缩
5×浓缩液设计，按1:4比例稀释使用，单瓶处理量大，经济实用，节省储存空间；
✪ 适配主流体系
兼容蓝绿及无色Native PAGE，适用于Tris-Glycine及Hepes等非变性电泳体系。