实验原理/Experimental principle
本试剂盒基于HRP标记的抗体直接检测和增强化学发光(ECL)原理。GFP(Green Fluorescent Protein)是从水母Aequorea victoria中分离得到的天然荧光蛋白,由238个氨基酸组成,分子量约27-30 kDa。GFP的独特之处在于其能自发形成荧光发色团(由第64-69位氨基酸环化形成),且无需任何辅因子或底物即可产生绿色荧光。
技术流程/Procedure
1.封闭:转膜完成后,加入封闭液,室温摇床封闭5分钟;
2.抗体孵育:弃去封闭液,加入稀释好的Anti-GFP Tag-HRP,室温摇床孵育10分钟;
3.洗涤:弃去抗体液,加入Western洗涤液,室温摇床洗涤30秒(重复3次);
4.检测:配制ECL工作液(A液:B液=1:1),覆盖印迹膜孵育0.5分钟,进行化学发光成像。
产品优势/Highlights
✪超快速检测
从完成转膜的印迹膜到获得蛋白条带仅需17分钟(封闭5分钟、抗体孵育10分钟、洗涤1.5分钟、ECL成像0.5分钟),大幅缩短实验周期;
✪ 操作简便
采用HRP直接偶联的Anti-GFP抗体,无需二抗孵育和洗涤步骤,简化操作流程;
✪灵敏度高
使用高灵敏度的化学发光试剂,检测灵敏度高,可检测低至纳克级别的GFP标签融合蛋白。